两种酵母单杂交系统的比较
两种酵母单杂系统比较
| 系统 | Y1HGold系统 | Y187系统 |
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| 酵母菌株 | Y1HGold | Y187 |
| 基因型 | MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1 | MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1 URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-LacZ |
| 诱饵载体 | pAbAi |
pHIS2 |
| 报告基因 | 抗性报告基因AUR1-C | 营养报告基因HIS3 |
| AbA抑制酵母中AUR1基因编码的肌醇磷脂酰胺合成酶的活性，突变基因AUR1-C的表达使转化酵母对AbA产生了抗性。低浓度的AbA就能杀死敏感的酵母菌株，能大大消除筛库时的背景克隆，降低假阳性； 3-AT是酵母His3p基因的竞争性抑制剂，它只能延缓菌株生长速度，不如AbA的作用直接，经过一段时间培养，非目的菌株也有可能在筛选板上生长，筛库时产生假阳性的概率相对较高。 |
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| 获得诱饵菌株方式 | 诱饵质粒线性化后整合到Y1HGold基因组中 | 诱饵质粒直接转入Y187细胞 |
| 线性化诱饵质粒整合到酵母基因组中能产生稳定的酵母报告菌株，其中每个细胞只有一个报告基因拷贝，从而控制背景表达水平。但这种方式比直接转化耗时久，因为要通过PCR扩增及测序鉴定诱饵是否正确整合到酵母基因组中去。 | ||
| 筛库方式 | 文库质粒转入诱饵酵母菌株中 | 文库质粒转入诱饵酵母菌株中或文库质粒与诱饵质粒共转酵母菌株 |
| 两种转化方式并不会对结果造成太大差异，前者使用质粒的量较少，后者操作简便耗时短 | ||
