核体系酵母建库
核体系酵母文库构建
目前，酵母建库有两种方法，一种是SMART法，一种是Gateway法，两种方法各有千秋。正和生物能够熟练运用这两种方法，无论您想用SMART法建库还是Gateway法建库，我们都能高质量交付，15个工作日即可完成一个库的构建。
一、服务详情
(1)Gateway建库
| 实验阶段 | 周期（工作日） | 交付材料 | 报价 |
|---|---|---|---|
| A、Total RNA抽提 | 2-3 | 1、文库构建报告 2、初级文库质粒 200ug 初级文库菌液*3 3、次级文库质粒 200ug 次级文库菌液*3 4、建库报告 5、单双杂载体及菌株 6、Y187酵母工作液 （50*1ml/管）（可选） |
询价 |
| B、mRNA富集 | 1-2 | ||
| C、反转录一链二链合成 | 1-2 | ||
| D、加三框接头片段分选 | 1-2 | ||
| E、初级重组+电转+初级文库抽提+测序及分析 | 5-7 | ||
| F、次级重组+电转+次级文库抽提+测序及分析 | 5-7 | ||
| G、转Y187（可选） | 10-15 |
(2)SMART建库
| 实验阶段 | 周期（工作日） | 交付材料 | 报价 |
|---|---|---|---|
| A、Total RNA抽提 | 2-3 | 1、文库质粒 200ug 文库菌液*3 2、建库报告 3、单双杂载体及菌株 4、Y187酵母工作液（50*1ml/管）（可选） |
询价 |
| B、反转录一链二链合成 | 2-3 | ||
| C、酶切胶回收 | 1-2 | ||
| D、片段分选产物与线性化载体预连接+测序分析 | 3-5 | ||
| E、片段分选产物与线性化载体连接+电转+质粒抽提+测序及分析 | 5-7 | ||
| F、转Y187（可选） | 10-15 |
二、样品要求
(1)Gateway建库
| 样本类型 | 总量 | 完整度/新鲜度 | OD260：280 | OD260：230 | 运输/储存 |
|---|---|---|---|---|---|
| Total RNA | 300-500ug | 28S：18S=2:1 | 1.9-2.1 | 1.9-2.1 | 干冰/-80℃ |
| 拟南芥 | ＞4g | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 动物组织 | ＞1g | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 细胞 | ＞1.0×107 | 去除培养液加上裂解液/新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 种子 | ＞8g | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 烟草 | ＞4g | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 根茎 | ＞8g | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 水稻叶片 | ＞4g | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ |
(2)SMART建库
| 样本类型 | 总量 | 完整度/新鲜度 | OD260：280 | OD260：230 | 运输/储存 |
|---|---|---|---|---|---|
| Total RNA | ＞10ug | 28S：18S=2:1 | 1.9-2.1 | 1.9-2.1 | 干冰/-80℃ |
| 拟南芥 | ＞10mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 动物组织 | ＞10mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 细胞 | ＞1.0×107 | 去除培养液加上裂解液/新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 种子 | ＞20mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 烟草 | ＞10mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 根茎 | ＞20mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 水稻叶片 | ＞10mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 水蛭 | ＞100mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ | ||
| 纤毛虫 | ＞200mg | 新鲜冻存 | 干冰/-80℃ |
三、服务流程
